产品描述

    EvaBio™ LTV transfection reagent 是一款性能优良的质粒DNA转染试剂，可 以高效转染分子量较大的病毒质粒，适用于慢病毒、腺相关病毒等病毒的包装，提高 病毒产量，与其它转染试剂相比，具有不受血清影响、转染效率高，细胞毒性低、操 作便捷，结果稳定可重复性等优点。

  【慢病毒包装步骤】 以3质粒系统，6孔板为例，请参考表1的转染规模调整，步骤如下： 

①细胞接种:293T细胞接种于6孔板，每孔接种1.0~2.0×105个细胞，细胞培养 12~24小时，使转染时细胞密度达到60~70%融合度； 

②质粒DNA稀释:将3µg包装质粒psPAX2,1ug包膜质粒pMD2G和4ug目的基因质粒 用Opti-MEM培养基稀释，稀释后的终体积为50µL 

 ③转染试剂稀释:取8μL的EvaBio™LTVtransfection reagent（ET0603）加入到 42μL的Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为50µL； 

④复合物制备：将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合，轻轻吹打均匀后，室 温静置10分钟； 

⑤转染:将上述100ul复合物加入到6孔板中，轻轻吹打混匀，转染6-12h,更换成新鲜 的细胞培养液，继续培养； 

⑥慢病毒收集：转染48h,收集第一批含有慢病毒的细胞培养液上清，再加入新鲜的 2ml新鲜2ml新鲜细胞培养液，24-48h后收集第二批含有慢病毒的细胞培养液上清； 

⑦离心：3000rpm,4°C离心5min,将上清液转入新的无菌离心管中保存，用于后续纯 化和感染。

【储存条件及保质期】 2-8℃保存，有效期12个月

慢病毒包装实验优化: 

可通过改变细胞密度、pDNA的浓度，几种构建慢病毒pDNA之间的配比以 EvaBio™ LTV Transfection Reagent （ET0603）浓度对慢病毒包装实验进行优化。 保证细胞融合度在60%以上，EvaBio™LTVTransfection Reagent （ET0603）(µL): DNA(µg,pDNA总质量)可以在1:1和3:1之间调整。

不同培养板所需转染试剂和DNA的用量

适用范围

EvaBio™ LTV transfection reagent   适用于慢病毒、腺相关病毒等病毒的包装，提高病毒产量

注意事项

1.本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。 

2.细胞状态：使用健康、低代数的细胞，状态差会显著降低转染效率。

 3. 无菌操作：全程在超净台内操作，避免污染。 

4. 试剂保存：转染试剂需2-8℃或-20℃避光保存**，避免反复冻融。 

5. 血清影响：部分转染试剂需在无血清条件下进行，转染后可补加血清。 

6. 毒性控制：若细胞死亡明显，可减少试剂用量或缩短复合物作用时间

【声明】

所有产品仅用于工业应用或者科学研究等非医疗目的,不可用于人类的临床诊断或者治疗。